محیط کشت ms

کشت بافت گیاهی به‌عنوان یکی از پایه‌ای‌ترین و در عین حال پیشرفته‌ترین تکنیک‌های زیست‌فناوری گیاهی، نقش کلیدی در تکثیر انبوه گیاهان، اصلاح نباتات، مهندسی ژنتیک، حفظ گونه‌های در معرض خطر و تولید متابولیت‌های ثانویه ایفا می‌کند. در قلب تمامی این فرآیندها، محیط کشت به‌عنوان بستر تأمین‌کننده عناصر غذایی، انرژی و سیگنال‌های رشدی قرار دارد. انتخاب صحیح محیط کشت می‌تواند تفاوت میان یک آزمایش موفق و یک شکست کامل باشد. در میان ده‌ها محیط کشت معرفی‌شده در طول دهه‌های گذشته، محیط کشت موراشیگ و اسکوگ (MS Medium) به‌عنوان استاندارد طلایی کشت بافت گیاهی شناخته می‌شود و همچنان پرکاربردترین محیط کشت در آزمایشگاه‌های تحقیقاتی و صنعتی است.

محیط کشت ms خرید

ترکیبات اصلی محیط کشت MS

عناصر پرمصرف (Macronutrients)

یکی از ویژگی‌های منحصربه‌فرد محیط MS، غلظت بالای عناصر ماکرو در مقایسه با سایر محیط‌های کشت گیاهی است. این عناصر شامل نیتروژن، فسفر، پتاسیم، کلسیم، منیزیم و گوگرد هستند. نیتروژن در محیط MS به‌صورت نیترات آمونیوم (NH₄NO₃) و نیترات پتاسیم (KNO₃) تأمین می‌شود که این ترکیب دوگانه باعث ایجاد تعادل میان فرم آمونیومی و نیتراتی نیتروژن می‌شود. نقش کلیدی نیتروژن در سنتز پروتئین‌ها، نوکلئیک اسیدها و رشد رویشی، دلیل اصلی موفقیت محیط MS در تحریک تقسیم سلولی است. فسفر به‌صورت دی‌هیدروژن فسفات پتاسیم (KH₂PO₄) در متابولیسم انرژی و ساخت ATP نقش دارد، در حالی که کلسیم، منیزیم و گوگرد به‌ترتیب در پایداری دیواره سلولی، فعالیت آنزیمی و سنتز اسیدهای آمینه گوگرددار اهمیت دارند.

عناصر کم‌مصرف (Micronutrients)

عناصر ریزمغذی اگرچه در مقادیر کم استفاده می‌شوند، اما برای عملکرد صحیح آنزیم‌ها و مسیرهای متابولیکی ضروری هستند. محیط MS شامل آهن، منگنز، روی، مس، بور، مولیبدن و کبالت است. آهن به‌صورت کمپلکس Fe-EDTA افزوده می‌شود تا از رسوب آن جلوگیری شده و قابلیت جذب افزایش یابد. وجود آهن پایدار یکی از عوامل کلیدی جلوگیری از کلروز در گیاهان کشت‌شده در محیط MS محسوب می‌شود.

ویتامین‌ها و ترکیبات آلی

محیط کشت MS معمولاً شامل تیامین (ویتامین B1) به‌عنوان ویتامین اصلی است، اگرچه در بسیاری از فرمولاسیون‌ها، نیکوتینیک اسید (B3) و پیریدوکسین (B6) نیز افزوده می‌شوند. تیامین نقش مهمی در متابولیسم کربوهیدرات‌ها و فعالیت آنزیم‌های دکربوکسیلاز دارد. علاوه بر ویتامین‌ها، مقدار کمی اینوزیتول به‌عنوان عامل تنظیم‌کننده رشد و پایداری غشای سلولی به محیط افزوده می‌شود.

منبع کربن

از آن‌جا که گیاهان کشت‌شده در شرایط in vitro اغلب توانایی فتوسنتز کامل ندارند، ساکارز به‌عنوان منبع اصلی کربن و انرژی به محیط MS اضافه می‌شود. غلظت معمول ساکارز در این محیط حدود ۳۰ گرم در لیتر است که این مقدار می‌تواند بسته به نوع گیاه یا هدف آزمایش تغییر یابد. نقش ساکارز در تأمین انرژی و تنظیم فشار اسمزی محیط بسیار حیاتی است.

تنظیم‌کننده‌های رشد گیاهی (Plant Growth Regulators)

یکی از انعطاف‌پذیرترین بخش‌های محیط MS، امکان افزودن انواع هورمون‌های گیاهی است. اکسین‌ها مانند IAA، NAA و 2,4-D عمدتاً برای القای کالوس و ریشه‌زایی استفاده می‌شوند، در حالی که سیتوکینین‌هایی مانند BAP و kinetin در تحریک جوانه‌زنی و تکثیر شاخساره نقش دارند. نسبت اکسین به سیتوکینین تعیین‌کننده مسیر تمایز بافت گیاهی است و تغییر این نسبت می‌تواند منجر به ریشه‌زایی، شاخساره‌زایی یا کالوس‌زایی شود.

عامل ژله‌کننده

برای جامدسازی محیط MS معمولاً از آگار یا در برخی موارد ژلان گام (Gelrite) استفاده می‌شود. انتخاب نوع و غلظت عامل ژله‌کننده بر سختی محیط، دسترسی به مواد غذایی و مورفولوژی ریشه‌ها تأثیر مستقیم دارد.

ویژگی‌های فیزیکوشیمیایی محیط MS

یکی از پارامترهای حیاتی در آماده‌سازی محیط کشت موراشیگ و اسکوگ، تنظیم pH است. pH استاندارد این محیط معمولاً در محدوده ۵٫۶ تا ۵٫۸ تنظیم می‌شود، زیرا این بازه بیشترین سازگاری را با جذب عناصر غذایی و فعالیت آنزیم‌های گیاهی دارد. پس از تنظیم pH، محیط در دمای بالا استریل می‌شود که این فرآیند ممکن است موجب تجزیه برخی ترکیبات حساس شود، از این رو هورمون‌ها اغلب پس از استریلیزاسیون به‌صورت فیلترشده اضافه می‌شوند.

معرف ها ms

• نمک های پایه
• ویتامین ها
• ماده بافر (MES)
• منبع کربن (ساکارز)
• عامل تقویت کننده (آگار)
• NaOH/HCl برای تنظیم pH

محیط کشت ms چیست

محیط B5 گامبورگ بستر رشد بهینه برای کشت سلول ها، بافت ها و اندام های گیاهی در شرایط آزمایشگاهی است. حاوی ترکیبی از نمک های معدنی، ویتامین ها و کربوهیدرات ها است. ما گامبورگ B5 Medium، Gamborg's Vitamin Blend و Gamborg's B5 Salt Blend را با حداقل محتوای ارگانیک ارائه می دهیم.

طرز تهیه محیط کشت ms

برای محیط جامد، از آگار یا فیتاژل استفاده کنید.
آگار: 5-10 گرم در لیتر
فیتاژل: 1.5-2.5 گرم در لیتر

روش نگهداری محیط کشت MS

شرایط نگهداری معمولی 4 درجه سانتیگراد است. صفحات حاوی املاح و ویتامین های ضروری، محیط مایع آماده شده و MS جامد را در این دما نگهداری کنید.

قیمت خرید محیط کشت ms

مواد در انواع گوناگونی در فروشگاه آنلاین و دارای نماد اعتماد الکترونیکی آریا طب با قیمت مناسب به فروش می رسد می توانید از طریق همین سایت نسبت به خرید آنلاین این محصولات اقدام نمایید.

فروش محیط کشت ms

تیم متخصص فروشگاه تجهیزات و دستگاه های آزمایشگاهی آریا طب همواره می کوشد تا با ارائه خدمات مناسب و مورد نیاز مشتریان همچون مشاوره خرید تجهیزات و مواد ازمایشگاهی، تجهیزات مطب ها و کلینیک ها و دستگاه های آزمایشگاهی نیاز آن ها را به تجهیزات پزشکی مرتفع سازد پس چنانچه قصد خرید دستگاه اتوکلاو را دارید همین حالا با مشاوران ما تماس حاصل نمایید و تمامی سوالات و ابهامات خود را برطرف نمایید و سپس نسبت به خرید مناسب ترین ست اقدام نمایید. امروزه خرید آنلاین به دلیل های مختلفی همچون سرعت بالا، حذف هزینه رفت و آمد، عدم اتلاف وقت و ... دارای طرفداران بسیاری بوده و رواج گسترده ای پیدا کرده می باشد به همین دلیل مدیران آریا طب شرایطی را مهیا کرده اند تا خرید از این فروشگاه به صورت آنلاین نیز امکان پذیر باشد پس برای خرید به صورت اینترنتی به صفحه معرفی محصولات رفته و با انتخاب محصول مورد نظر و اضاف کردن آن به سبد خرید خود، فرم مربوطه را تکمیل نمایید سپس از طریق درگاه بانکی مربوطه هزینه آن را پرداخت کرده تا سفارش شما به مرحله ثبت نهایی برسد و همکاران ما در اسرع وقت آن را درب منزل یا محل کارتان به شما تحویل دهند.

کشت بافت گیاهی، یکی از روش‌های مهم تکثیر گیاهان و تولید گیاهان عاری از بیماری است. محیط کشت MS به عنوان یکی از پرکاربردترین محیط‌های کشت در این زمینه، نقش بسیار مهمی ایفا می‌کند. در این مقاله، به صورت گام به گام و با زبانی ساده، نحوه تهیه محیط کشت MS را آموزش می‌دهیم. با ما همراه باشید تا با ترکیبات، مراحل و نکات کلیدی این فرآیند آشنا شوید.

ترکیبات محیط کشت ms

محیط کشت MS شامل سه گروه اصلی از ترکیبات است:

1. نمک‌های معدنی: این نمک‌ها حاوی عناصر ضروری برای رشد گیاه مانند نیتروژن، فسفر، پتاسیم، کلسیم، منیزیم و عناصر کمیاب هستند.

2. ویتامین‌ها: ویتامین‌هایی مانند نیکوتینیک اسید، پیریدوکسین و تیامین برای رشد و نمو سلول‌های گیاهی ضروری هستند.

3. ترکیبات آلی: ترکیبات آلی مانند میو اینوسیتول و آمینواسیدها نیز به محیط کشت اضافه می‌شوند.

دستور ساخت محیط کشت MS

کاربردهای محیط کشت موراشیگ و اسکوگ

تکثیر گیاهان (Micropropagation)

یکی از اصلی‌ترین کاربردهای محیط MS، ریزازدیادی گیاهان زینتی، دارویی، کشاورزی و جنگلی است. این محیط امکان تولید تعداد زیادی گیاه یکنواخت ژنتیکی را در مدت زمان کوتاه فراهم می‌کند و به‌ویژه در گیاهانی که تکثیر سنتی آن‌ها دشوار است، اهمیت بالایی دارد.

کشت کالوس و سلول

محیط MS به‌طور گسترده برای القای کالوس از انواع بافت‌های گیاهی مانند برگ، ساقه و ریشه استفاده می‌شود. کالوس‌ها می‌توانند به‌عنوان منبعی برای تولید متابولیت‌های ثانویه، مطالعات ژنتیکی و مهندسی متابولیک به‌کار روند.

مهندسی ژنتیک و تراریختی

در فرآیندهای ترانسفورماسیون ژنتیکی با استفاده از آگروباکتریوم یا روش‌های فیزیکی، محیط MS نقش اساسی در باززایی گیاه کامل از سلول‌های تراریخت ایفا می‌کند. بدون یک محیط کشت کارآمد مانند MS، تولید گیاهان تراریخته عملاً غیرممکن خواهد بود.

حفظ ژرم‌پلاسم و گونه‌های در معرض خطر

محیط کشت موراشیگ و اسکوگ در برنامه‌های حفاظت از تنوع زیستی و نگهداری گونه‌های نادر یا در معرض انقراض به‌صورت in vitro کاربرد گسترده‌ای دارد.

مزایا و محدودیت‌های محیط MS

مزایای محیط کشت MS شامل غنای غذایی بالا، انعطاف‌پذیری در تنظیم هورمونی، قابلیت استفاده برای طیف وسیعی از گیاهان و استاندارد بودن فرمولاسیون است. با این حال، غلظت بالای نمک‌ها ممکن است برای برخی گیاهان حساس باعث استرس اسمزی یا سمیت یونی شود. به همین دلیل، نسخه‌های اصلاح‌شده‌ای مانند ½ MS یا MS رقیق‌شده برای برخی گونه‌ها توصیه می‌شود.

مراحل تهیه محیط کشت MS

1. محاسبه دقیق مواد: بر اساس حجم مورد نیاز محیط کشت، مقدار دقیق هر یک از مواد را محاسبه کنید.

2. حل کردن مواد در آب مقطر: مواد را به ترتیب مشخص شده در آب مقطر حل کنید.

3. تنظیم pH: pH محلول را با استفاده از یک pH متر به مقدار 5.8 برسانید.

4. اضافه کردن آگار: آگار را به محلول اضافه کرده و با حرارت ملایم هم بزنید تا کاملاً حل شود.

5. اتوکلاو کردن: محلول را در اتوکلاو استریل کنید.

6. سرد کردن و استفاده: پس از سرد شدن، محیط کشت آماده استفاده است.

نکات مهم در تهیه محیط کشت MS

• کیفیت آب مقطر: از آب مقطر با کیفیت بالا استفاده کنید.

• استریلیزاسیون: تمام ابزار و ظروف مورد استفاده باید کاملاً استریل باشند.

• نگهداری: محیط کشت استریل را در دمای یخچال نگهداری کنید.

• هورمون‌های گیاهی: برای القای ریشه زایی یا ساقه زایی، می‌توانید هورمون‌های گیاهی مانند آئوسین و کینتین را به محیط کشت اضافه کنید.

کاربردهای محیط کشت MS

• تکثیر گیاهان: از محیط کشت MS برای تکثیر گیاهان زینتی، دارویی و کشاورزی استفاده می‌شود.

• تولید گیاهان عاری از بیماری: با استفاده از کشت بافت می‌توان گیاهانی عاری از ویروس و باکتری تولید کرد.

• مطالعات فیزیولوژی گیاهی: محیط کشت MS برای انجام تحقیقات مختلف در زمینه فیزیولوژی گیاهی کاربرد دارد.

محیط کشت موراشیگ اسکوگ

• چرا از محیط کشت MS استفاده می‌شود؟ محیط کشت MS به دلیل تعادل مناسب مواد مغذی، به عنوان یک محیط استاندارد برای کشت بافت گیاهی شناخته شده است.

• آیا می‌توان از محیط کشت MS برای همه گیاهان استفاده کرد؟ در حالی که محیط کشت MS برای بسیاری از گیاهان مناسب است، ممکن است برای برخی گونه‌ها نیاز به تغییراتی در فرمولاسیون باشد.

• چگونه pH محیط کشت را تنظیم کنیم؟ برای تنظیم pH از محلول‌های اسیدی یا بازی استفاده می‌شود.