محیط کشت لیزین آیرون آگار

محیط کشت لایزین آیرون آگار مرک

محیط کشت لیزین آیرون آگار (LIA)

محیط کشت لیزین آیرون آگار (Lysine Iron Agar) یک محیط کشت جامد و انتخابی-افتراقی است که برای تشخیص و تمایز بین باکتری‌های روده‌ای بر اساس توانایی آن‌ها در دکربوکسیلاسیون لیزین، تولید سولفید هیدروژن و تخمیر گلوکز استفاده می‌شود. این محیط به ویژه برای شناسایی جنس سالمونلا و شیگلا کاربرد دارد.

ترکیب محیط کشت LIA

• لیزین: سوبسترای اصلی برای آنزیم دکربوکسیلاز لیزین

• گلوکز: منبع کربن برای تخمیر

• تیوسولفات سدیم: منبع گوگرد برای تولید سولفید هیدروژن

• فریک کلرید: واکنش با سولفید هیدروژن تولید شده و ایجاد رنگ سیاه می‌کند

• فنل رد: نشانگر pH که در محیط اسیدی زرد و در محیط قلیایی قرمز می‌شود

• آگار: عامل جامد کننده محیط

مکانیسم عمل

• دکربوکسیلاسیون لیزین: باکتری‌هایی که آنزیم دکربوکسیلاز لیزین تولید می‌کنند، لیزین را به کاداورین و آمونیاک تبدیل می‌کنند. آمونیاک باعث افزایش pH محیط شده و نشانگر فنل رد به رنگ قرمز تغییر رنگ می‌دهد.

• تخمیر گلوکز: باکتری‌هایی که قادر به تخمیر گلوکز هستند، اسید تولید می‌کنند و در نتیجه نشانگر فنل رد به رنگ زرد تغییر رنگ می‌دهد.

• تولید سولفید هیدروژن: باکتری‌هایی که آنزیم تیوسولفات ردوکتاز تولید می‌کنند، تیوسولفات را به سولفید هیدروژن تبدیل می‌کنند. سولفید هیدروژن با فریک کلرید واکنش داده و ایجاد رنگ سیاه در عمق محیط می‌کند.

کاربردهای LIA

• تشخیص سالمونلا و شیگلا: سالمونلا معمولاً دکربوکسیلاز لیزین مثبت و تولید کننده سولفید هیدروژن است، در حالی که شیگلا معمولاً هر دو ویژگی را ندارد.

• تشخیص سایر باکتری‌های روده‌ای: LIA برای تشخیص سایر باکتری‌های روده‌ای مانند پروتئوس و اشرشیا کلی نیز استفاده می‌شود.

تفسیر نتایج

• تغییر رنگ قرمز در کل محیط: دکربوکسیلاسیون لیزین مثبت

• تغییر رنگ زرد در سطح محیط: تخمیر گلوکز مثبت

• تغییر رنگ سیاه در عمق محیط: تولید سولفید هیدروژن مثبت

نکات مهم

• کنترل کیفی: همیشه از یک کنترل مثبت و یک کنترل منفی استفاده کنید.

• زمان انکوباسیون: معمولاً 18-24 ساعت در دمای 35-37 درجه سانتی‌گراد

• تفسیر دقیق: برای تفسیر دقیق نتایج، باید به تمام تغییرات رنگی در محیط توجه شود.

اهمیت LIA

LIA یک محیط کشت بسیار مفید در تشخیص باکتری‌های روده‌ای، به ویژه سالمونلا و شیگلا، است. این محیط به دلیل سادگی و اطلاعات مفیدی که ارائه می‌دهد، به طور گسترده در آزمایشگاه‌های میکروبیولوژی استفاده می‌شود.